수업 1시스템 구성 및 배관: 탈기, 자동샘플러, 컬럼 전환 및 체류 체적 영향방법 성능에 영향을 미치는 주요 시스템 구성 요소와 배관을 검토합니다. 탈기, 자동샘플러 설계, 튜빙 치수, 컬럼 전환을 포함하며, 체류 체적과 컬럼 외 분산 제어를 강조합니다.
탈기 방법 및 기포 방지자동샘플러 설계 및 캐리오버 제어튜빙 ID, 길이 및 분산 효과컬럼 전환 밸브 및 설정체류 체적 측정 및 조정수업 2고정상 선택: C18 화학, 기공 크기, 입자 크기, 엔드캡핑, 하이브리드 vs 실리카역상 고정상을 선택하는 방법을 자세히 설명하며, C18 변형, 기공 및 입자 크기, 엔드캡핑, 하이브리드 vs 순수 실리카에 중점을 둡니다. 분석물 특성과 방법 목표에 맞는 상 화학 선택을 강조합니다.
C18 결합 밀도 및 리간드 유형엔드캡핑 vs 비엔드캡핑 상소분자 vs 펩타이드용 기공 크기하이브리드 실리카 vs 전통 실리카 상성능 요구에 따른 입자 크기 선택수업 3제약 연구실의 실용적 제약: 샘플 처리량, 견고성, 용매 호환성제약 연구실의 실제 제약사항을 다루며, 샘플 처리량, 견고성, 용매 호환성, 수명 주기 관리를 포함합니다. 규제 기대를 실용적인 방법 및 장비 선택과 연결합니다.
실행 시간과 분리도 균형방법 견고성 및 견고성 연구분석물 및 씰과의 용매 호환성용매 사용 및 폐기물 최소화일상 방법에 대한 규제 기대수업 4역상 HPLC 원리 및 유지 메커니즘역상 HPLC의 핵심 원리를 소개하며, 소수성 상호작용, 분배, 이동상 조성의 역할을 포함합니다. 유지 메커니즘을 방법 개발의 실용적 선택과 연결합니다.
소수성 상호작용 및 분배유지력에서 유기 변성제 역할분석물 극성 및 logP 효과온도에 대한 유지력 영향역상 HPLC에서 이온화 분석물수업 5UV 검출기 선택 및 파장 최적화: 스펙트럼 스캐닝, 다이오드 어레이 사용, 감도 트레이드오프UV 검출기 선택 및 파장 최적화를 다루며, 고정 파장, 가변 파장, 다이오드 어레이 검출기를 포함합니다. 스펙트럼 스캐닝, 피크 순도 확인, 감도와 선택성 및 노이즈 균형을 설명합니다.
고정 vs 가변 vs 다이오드 어레이 검출기UV 스펙트럼에서 λmax 선택밴드패스, 노이즈, 감도 트레이드오프DAD 스펙트럼으로 피크 순도 평가선형 범위 및 검출기 포화 한계수업 6등온 vs 구배 선택: 각 사용 시기, 구배 경사, 체류 체적 고려사항등온 및 구배 용출을 비교하며, 각 적합한 상황을 설명합니다. 구배 프로파일 설계, 경사 및 실행 시간, 체류 체적 효과, HPLC 시스템 간 견고한 구배 전송 전략을 다룹니다.
등온 vs 구배 용출 선택 시기초기 및 최종 이동상 강도 설계구배 경사, 실행 시간, 분리도시스템 체류 체적 및 구배 지연장비 간 구배 전송수업 7pH 선택: pKa 관계, 약산/염기 유지력 및 피크 형태에 미치는 영향분석물 pKa 대비 이동상 pH가 약산 및 염기의 이온화, 유지력, 피크 대칭을 제어하는 방법을 설명하며, 분리도, 견고성, 컬럼 수명을 개선하기 위한 pH 선택 지침을 제공합니다.
pH 대비 약산 및 염기 이온화pH 선택을 위한 Henderson-Hasselbalch 사용pH가 유지력 및 선택성에 미치는 영향pH가 피크 꼬리 및 전단에 미치는 영향실리카 컬럼 안정성을 위한 버퍼 pH 한계수업 8이동상 제제: 버퍼(인산염, 아세테이트, 암모늄), 이온 강도, 버퍼 제조이동상 버퍼 선택 및 제조에 중점을 두며, 인산염, 아세테이트, 휘발성 암모늄 버퍼를 다룹니다. 이온 강도, pH 제어, 용해도, 여과, 검출기 및 컬럼 호환성을 논의합니다.
버퍼 종류 및 pH 범위 선택버퍼 용량 및 이온 강도 효과버퍼 제조, 여과, 탈기고유기 함량에서의 버퍼 용해도MS 호환성을 위한 휘발성 버퍼수업 9유기 변성제: 메탄올 vs 아세토니트릴 효과, 용매 강도 및 선택성역상 HPLC에서 메탄올과 아세토니트릴이 용매 강도, 점도, 선택성에서 어떻게 다른지 설명합니다. 혼합 유기 시스템, 온도 상호작용, 비용 및 안전과 같은 실용적 고려사항을 논의합니다.
일반 RP 용출계에서의 용매 강도점도, 역압, 온도 효과MeOH vs ACN 선택성 차이조정을 위한 혼합 유기 변성제 사용안전, 비용, 공급 고려사항수업 10유속, 온도, 주입 체적: 효율성, 역압, 피크 형태에 미치는 영향유속, 컬럼 온도, 주입 체적이 효율성, 역압, 유지력, 피크 형태에 미치는 영향을 설명합니다. 유속 스케일링 규칙, 과부하 방지, 견고성을 위한 온도 최적화 지침을 제공합니다.
Van Deemter 및 최적 유속 선택유지력 및 반응속도에 대한 온도 효과주입 체적 및 컬럼 과부하용매 불일치 및 피크 왜곡컬럼 ID 및 길이에 따른 유속 스케일링수업 11컬럼 치수 및 입자 크기 트레이드오프: 길이, ID, 3–5 µm vs sub-2 µm컬럼 길이, 내경, 입자 크기가 효율성, 역압, 감도, 분석 시간에 미치는 영향을 설명합니다. 3–5 µm vs sub-2 µm 컬럼 선택 및 시스템 간 치수 스케일링 지침을 제공합니다.
컬럼 길이가 분리도 및 시간에 미치는 영향내경 및 감도 고려사항3–5 µm vs sub-2 µm 효율성 및 압력컬럼 치수 간 방법 스케일링가드 컬럼 및 프릿 설계 영향