पाठ 1प्रणाली विन्यास और पाइपिंग: डीगैसिंग, ऑटोसैंपलर, कॉलम स्विचिंग और ड्वेल वॉल्यूम प्रभावविधि प्रदर्शन को प्रभावित करने वाली प्रमुख प्रणाली घटकों और पाइपिंग की समीक्षा करता है, जिसमें डीगैसिंग, ऑटोसैंपलर डिजाइन, ट्यूबिंग आयाम और कॉलम स्विचिंग शामिल हैं। ड्वेल वॉल्यूम और अतिरिक्त-कॉलम फैलाव नियंत्रण पर जोर देता है।
डीगैसिंग विधियाँ और बुलबुले रोकथामऑटोसैंपलर डिजाइन और कैरीओवर नियंत्रणट्यूबिंग आईडी, लंबाई और फैलाव प्रभावकॉलम स्विचिंग वाल्व और सेटअपड्वेल वॉल्यूम मापना और समायोजित करनापाठ 2स्थिर अवस्था चयन: सी18 रसायन, छिद्र आकार, कण आकार, एंडकैपिंग, हाइब्रिड बनाम सिलिकारिवर्स्ड-फेज स्थिर अवस्थाओं का चयन कैसे करें, इसकी विस्तृत जानकारी, सी18 प्रकारों, छिद्र और कण आकार, एंडकैपिंग तथा हाइब्रिड बनाम शुद्ध सिलिका पर केंद्रित। अवस्था रसायन को विश्लेष्य गुणों और विधि लक्ष्यों से मिलाने पर जोर।
सी18 बंधन घनत्व और लिगैंड प्रकारएंडकैप्ड बनाम गैर-एंडकैप्ड अवस्थाएँछोटे अणुओं बनाम पेप्टाइड्स के लिए छिद्र आकारहाइब्रिड सिलिका बनाम पारंपरिक सिलिका अवस्थाएँप्रदर्शन आवश्यकताओं के लिए कण आकार चुननापाठ 3औषधीय प्रयोगशालाओं के लिए व्यावहारिक बाधाएँ: नमूना थ्रूपुट, मजबूती और विलायक संगतताऔषधीय प्रयोगशालाओं में वास्तविक बाधाओं का समाधान, जिसमें नमूना थ्रूपुट, मजबूती, विलायक संगतता और जीवनचक्र प्रबंधन शामिल हैं। नियामक अपेक्षाओं को व्यावहारिक विधि और यंत्र चयनों से जोड़ता है।
रन समय और रिज़ॉल्यूशन संतुलित करनाविधि मजबूती और कठोरता अध्ययनविश्लेष्यों और सीलों के साथ विलायक संगतताविलायक उपयोग और अपशिष्ट निपटान न्यूनतम करनानियमित विधियों के लिए नियामक अपेक्षाएँपाठ 4रिवर्स्ड-फेज एचपीएलसी के सिद्धांत और रिटेंशन तंत्ररिवर्स्ड-फेज एचपीएलसी के मूल सिद्धांतों का परिचय, जिसमें हाइड्रोफोबिक अंतर्क्रियाएँ, विभाजन और मोबाइल फेज संरचना की भूमिका शामिल है। रिटेंशन तंत्रों को विधि विकास के व्यावहारिक चयनों से जोड़ता है।
हाइड्रोफोबिक अंतर्क्रियाएँ और विभाजनरिटेंशन में ऑर्गेनिक मॉडिफायर की भूमिकाविश्लेष्य ध्रुवीयता और logP का प्रभावतापमान का रिटेंशन पर प्रभावरिवर्स्ड-फेज एचपीएलसी में आयनाइज करने योग्य विश्लेष्यपाठ 5यूवी डिटेक्टर के लिए डिटेक्टर चयन और तरंगदैर्ध्य अनुकूलन: स्पेक्ट्रा स्कैनिंग, डायोड-एरे उपयोग, संवेदनशीलता व्यापार-बंदयूवी डिटेक्टर चयन और तरंगदैर्ध्य अनुकूलन को कवर करता है, जिसमें फिक्स्ड-तरंगदैर्ध्य, वेरिएबल-तरंगदैर्ध्य और डायोड-एरे डिटेक्टर शामिल हैं। स्पेक्ट्रा स्कैनिंग, पीक शुद्धता जाँच और संवेदनशीलता को चयनात्मकता तथा शोर के साथ संतुलित करने की व्याख्या करता है।
फिक्स्ड बनाम वेरिएबल बनाम डायोड-एरे डिटेक्टरयूवी स्पेक्ट्रा से λmax चयनबैंडपास, शोर और संवेदनशीलता व्यापार-बंदDAD स्पेक्ट्रा के साथ पीक शुद्धता मूल्यांकनरैखिक सीमा और डिटेक्टर संतृप्ति सीमाएँपाठ 6ग्रेडिएंट बनाम आइसोक्रेटिक चयन: प्रत्येक का उपयोग कब करें, ग्रेडिएंट ढलान, ड्वेल वॉल्यूम विचारआइसोक्रेटिक और ग्रेडिएंट इल्यूशन की तुलना करता है, प्रत्येक के उपयुक्त होने पर व्याख्या करता है। ग्रेडिएंट प्रोफाइल डिजाइन, ढलान और रन समय, ड्वेल वॉल्यूम प्रभाव तथा एचपीएलसी प्रणालियों के बीच मजबूत ग्रेडिएंट स्थानांतरण के व्यावहारिक रणनीतियों को कवर करता है।
आइसोक्रेटिक बनाम ग्रेडिएंट इल्यूशन कब चुनेंप्रारंभिक और अंतिम मोबाइल फेज शक्ति डिजाइनग्रेडिएंट ढलान, रन समय और रिज़ॉल्यूशनप्रणाली ड्वेल वॉल्यूम और ग्रेडिएंट विलंबयंत्रों के बीच ग्रेडिएंट स्थानांतरित करनापाठ 7पीएच चयन: पीकेए संबंध, कमजोर अम्ल/क्षारों के लिए रिटेंशन और पीक आकार पर प्रभावमोबाइल फेज पीएच विश्लेष्य पीकेए के सापेक्ष आयनाकरण, रिटेंशन और पीक सममिति को नियंत्रित कैसे करता है, यह व्याख्या करता है, कमजोर अम्लों और क्षारों के लिए, रिज़ॉल्यूशन, मजबूती और कॉलम जीवनकाल सुधारने के लिए पीएच चुनने का मार्गदर्शन सहित।
कमजोर अम्लों और क्षारों का पीएच बनाम आयनाकरणपीएच चयन के लिए हेंडरसन-हासेलबालच उपयोगरिटेंशन और चयनात्मकता पर पीएच प्रभावपीक पूंछिंग और फ्रंटिंग पर पीएच प्रभावसिलिका कॉलम स्थिरता के लिए बफर पीएच सीमाएँपाठ 8मोबाइल फेज फॉर्मूलेशन: बफर (फॉस्फेट, एसीटेट, अमोनियम), आयनिक शक्ति और बफर तैयारीमोबाइल फेज बफर चयन और तैयारी पर केंद्रित, फॉस्फेट, एसीटेट और वाष्पशील अमोनियम बफर को कवर करता है। आयनिक शक्ति, पीएच नियंत्रण, घुलनशीलता, निस्पंदन तथा डिटेक्टरों और कॉलमों के साथ संगतता पर चर्चा करता है।
बफर प्रजाति और पीएच सीमा चुननाबफर क्षमता और आयनिक शक्ति प्रभावबफर तैयार करना, निस्पंदन और डीगैसिंगउच्च ऑर्गेनिक सामग्री के साथ बफर घुलनशीलताएमएस संगतता के लिए वाष्पशील बफरपाठ 9ऑर्गेनिक मॉडिफायर: मीथेनॉल बनाम एसीटोनिट्राइल प्रभाव, विलायक शक्ति और चयनात्मकतामीथेनॉल और एसीटोनिट्राइल विलायक शक्ति, चिपचिपाहट और रिवर्स्ड-फेज एचपीएलसी में चयनात्मकता में कैसे भिन्न हैं, यह व्याख्या करता है। मिश्रित ऑर्गेनिक प्रणालियों, तापमान अंतर्क्रियाओं तथा लागत और सुरक्षा जैसे व्यावहारिक विचारों पर चर्चा करता है।
सामान्य आरपी इल्यूट्रोपिक स्केलों में विलायक शक्तिचिपचिपाहट, बैकप्रेशर और तापमान प्रभावचयनात्मकता भिन्नताएँ मीओएच बनाम एसीएनसमायोजन के लिए मिश्रित ऑर्गेनिक मॉडिफायर उपयोगसुरक्षा, लागत और आपूर्ति विचारपाठ 10प्रवाह दर, तापमान और इंजेक्शन वॉल्यूम: दक्षता, बैकप्रेशर और पीक आकार पर प्रभावप्रवाह दर, कॉलम तापमान और इंजेक्शन वॉल्यूम दक्षता, बैकप्रेशर, रिटेंशन और पीक आकार को कैसे प्रभावित करते हैं, इसका वर्णन करता है। प्रवाह स्केलिंग, अधिभार से बचाव और मजबूती के लिए तापमान अनुकूलन के नियम प्रदान करता है।
वान डीम्टर और इष्टतम प्रवाह चयनरिटेंशन और गतिकी पर तापमान प्रभावइंजेक्शन वॉल्यूम और कॉलम अधिभारविलायक असंगति और पीक विकृतिकॉलम आईडी और लंबाई के साथ प्रवाह स्केलिंगपाठ 11कॉलम आयाम और कण आकार व्यापार-बंद: लंबाई, आईडी, 3-5 माइक्रॉन बनाम सब-2 माइक्रॉनकॉलम लंबाई, आंतरिक व्यास और कण आकार दक्षता, बैकप्रेशर, संवेदनशीलता और विश्लेषण समय को कैसे प्रभावित करते हैं, इसका वर्णन करता है। 3-5 माइक्रॉन बनाम सब-2 माइक्रॉन कॉलम चुनने तथा प्रणालियों के बीच आयाम स्केलिंग का मार्गदर्शन प्रदान करता है।
रिज़ॉल्यूशन और समय पर कॉलम लंबाई प्रभावसंवेदनशीलता विचारों के साथ आंतरिक व्यास3-5 माइक्रॉन बनाम सब-2 माइक्रॉन दक्षता और दबावकॉलम आयामों के बीच विधियों का स्केलिंगगार्ड कॉलम और फ्रिट डिजाइन प्रभाव