سبق 1ਹੌਲੀ ਅਟੈਚਿੰਗ ਜਾਂ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ ਪ੍ਰਾਇਮਰੀ-ਵਰਗੀਆਂ ਐਪੀਥੀਲੀਅਲ ਕੰਟਰੋਲਾਂ ਦਾ ਹੈਂਡਲਿੰਗ (ਕੋਟਿੰਗ, ਐਕਸਟਰਾਸੈਲੂਲਰ ਮੈਟ੍ਰਿਕਸ, ਫੀਡਰ ਲੇਅਰਾਂ)ਇਹ ਭਾਗ ਫ੍ਰੈਜ਼ਾਈਲ ਜਾਂ ਹੌਲੀ ਅਟੈਚਿੰਗ ਐਪੀਥੀਲੀਅਲ ਕੰਟਰੋਲਾਂ ਨੂੰ ਸਰਫੇਸ ਕੋਟਿੰਗਸ, ਐਕਸਟਰਾਸੈਲੂਲਰ ਮੈਟ੍ਰਿਕਸ ਪ੍ਰੋਟੀਨਾਂ ਅਤੇ ਫੀਡਰ ਲੇਅਰਾਂ ਨਾਲ ਸਮਰਥਨ ਕਰਨ ਦੇ ਤਰੀਕੇ ਸਮਝਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਐਡਹੀਸ਼ਨ, ਪੋਲੈਰਿਟੀ ਅਤੇ ਬੈਰੀਅਰ ਫੰਕਸ਼ਨ ਨੂੰ ਅਪਟੀਮਾਈਜ਼ ਕਰਨ ਅਤੇ ਸਟ੍ਰੈੱਸ ਨੂੰ ਸੀਮਿਤ ਕਰਨ ਉੱਤੇ ਜ਼ੋਰ ਦਿੰਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਖਾਸ ਕਲਚਰ ਲੋੜਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰਦਾ ਹੈ।
Selecting appropriate ECM proteins and coatingsOptimizing coating concentration and incubation timeFeeder layer selection, preparation, and irradiationPlating density for fragile epithelial monolayersMonitoring morphology and junction integrityسبق 2ਥਾਅਇੰਗ ਅਤੇ ਪਹਿਲਾਂ ਰਿਕਵਰੀ ਵਰਕਫਲੋ: ਸਟੈਪਵਾਈਜ਼ ਪ੍ਰੋਸੀਜਰ, ਅਪੇਕਸ਼ਿਤ ਸਮੇਂ, ਵਾਇਏਬਿਲਟੀ ਚੈੱਕਸਇਹ ਭਾਗ ਕ੍ਰਾਇੋਵਾਇਲਾਂ ਨੂੰ ਥਾਅਇੰਗ ਲਈ ਬੈਸਟ ਪ੍ਰੈਕਟਿਸਿਸ ਦੀ ਰੂਪਰੇਖਾ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਤੇਜ਼ ਥਾਅ, ਸਟੈਪਵਾਈਜ਼ ਡਾਇਲੂਸ਼ਨ, ਕ੍ਰਾਇਓਪ੍ਰੋਟੈਕਟੈਂਟ ਹਟਾਉਣਾ, ਅਰਲੀ ਮੀਡੀਆ ਬਦਲਾਅ ਅਤੇ ਵਾਇਏਬਿਲਟੀ ਚੈੱਕਸ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ, ਅਟੈਚਮੈਂਟ, ਰਿਕਵਰੀ ਅਤੇ ਪਹਿਲੇ ਪੋਸਟ-ਥਾਅ ਪੈਸੇਜ ਲਈ ਰੀਅਲਿਸਟਿਕ ਸਮੇਂ ਨਾਲ। ਇਹ ਰਿਕਵਰੀ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ।
Preparing water bath, media, and vesselsRapid thaw and controlled dilution stepsRemoving DMSO and minimizing osmotic shockPost-thaw attachment and morphology checksTiming first passage after recoveryسبق 3ਚੁਣੀਆਂ ਟਿਊਮਰ ਅਤੇ ਕੰਟਰੋਲ ਲਾਈਨਾਂ ਲਈ ਸਟੈਂਡਰਡ ਮੀਡੀਆ ਰਚਨਾਵਾਂ (ਬੇਸਲ ਮੀਡੀਆ, % ਸੀਰਮ, ਆਮ ਸਪਲੀਮੈਂਟਸ)ਇਹ ਭਾਗ ਰਿਪ੍ਰੈਜ਼ੈਂਟੇਟਿਵ ਟਿਊਮਰ ਅਤੇ ਕੰਟਰੋਲ ਲਾਈਨਾਂ ਲਈ ਸਟੈਂਡਰਡ ਮੀਡੀਆ ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨਾਂ ਦੀ ਸਮੀਖਿਆ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਬੇਸਲ ਮੀਡੀਆ ਚੋਣ, ਸੀਰਮ ਪ੍ਰਤੀਸ਼ਤ, ਅਤੇ ਆਮ ਸਪਲੀਮੈਂਟਸ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ, ਅਤੇ ਲਾਈਨੇਜ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਫੀਨੋਟਾਈਪਸ ਨੂੰ ਬਚਾਉਂਦੇ ਰਹਿਣ ਵਾਲੀਆਂ ਰੈਸਿਪੀਆਂ ਅਨੁਕੂਲ ਕਰਨ ਦੀ ਵਿਆਖਿਆ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਕਲਚਰ ਲੋੜਾਂ ਨੂੰ ਅਨੁਕੂਲ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ।
Selecting basal media for key model linesTypical serum percentages by lineageUsing glutamine, pyruvate, and buffering agentsGrowth factors and hormone supplementsAdapting vendor-recommended recipes safelyسبق 4ਪੈਸੇਜ ਰੇਸ਼ੋ, ਸਪਲਿਟ ਸ਼ੈਡਿਊਲ, ਅਤੇ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਡਬਲਿੰਗ ਸਮਾਂ ਬਦਲਣ ਤੇ ਸਪਲਿਟ ਅਨੁਕੂਲ ਕਰਨਾਇਹ ਭਾਗ ਪੈਸੇਜ ਰੇਸ਼ੋ ਅਤੇ ਸਪਲਿਟ ਸ਼ੈਡਿਊਲ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ, ਡਬਲਿੰਗ ਸਮਾਂ ਨਿਗਰਾਨੀ ਕਰਨ ਅਤੇ ਵਿਕਾਸ ਬਦਲਣ ਤੇ ਸੀਡਿੰਗ ਘਨਤਵ ਅਨੁਕੂਲ ਕਰਨ ਦੇ ਤਰੀਕੇ ਸਮਝਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਓਵਰਗ੍ਰੋਥ, ਸੈਨੈਸੈਂਸ ਜਾਂ ਡ੍ਰਿਫਟ ਨੂੰ ਰੋਕਦਾ ਹੈ ਜਦੋਂ ਕਿ ਐਕਸਪੈਰੀਮੈਂਟਲ ਇਕਸਾਰਤਾ ਬਣਾਈ ਰੱਖਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਵਿਕਾਸ ਪ੍ਰਬੰਧਨ ਨੂੰ ਸੁਧਾਰਦਾ ਹੈ।
Calculating split ratios from cell countsDesigning routine passage schedulesTracking doubling time and growth curvesAdjusting seeding density as growth shiftsRecognizing senescence and culture declineسبق 5ਇੰਕਿਊਬੇਟਰ ਸ਼ਰਤਾਂ: ਤਾਪਮਾਨ, CO2, ਨਮੀ, ਅਤੇ ਉਪਯੁਕਤ ਕਲਚਰ ਵੈੱਸਲ ਚੋਣਇਹ ਭਾਗ ਇੰਕਿਊਬੇਟਰ ਸ਼ਰਤਾਂ ਨਿਰਮਾਣ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਤਾਪਮਾਨ, CO₂, ਨਮੀ ਅਤੇ ਲਾਗੂ ਹੋਣ ਤੇ ਆਕਸੀਜਨ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ, ਅਤੇ ਗੈਸ ਐਕਸਚੇਂਜ, ਬਾਸ਼ਪੀਕਰਨ ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਤੇ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਜੋਖਮ ਨੂੰ ਮੈਚ ਕਰਨ ਲਈ ਕਲਚਰ ਵੈੱਸਲਾਂ ਅਤੇ ਭਰਾਈ ਵਾਲੀਅਮ ਨੂੰ ਚਰਚਾ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਆਦਰਸ਼ ਵਾਤਾਵਰਣ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ।
Setting temperature, CO₂, and humidity rangesManaging incubator water pans and cleaningUsing ambient versus reduced oxygen cultureChoosing flasks, plates, and multilayer vesselsOptimizing fill volume and gas exchangeسبق 6ਰੱਖ-ਰਖਾਵ ਦੌਰਾਨ ਰਿਕਾਰਡ ਰੱਖਣਾ: ਵਿਕਾਸ ਲੌਗ, ਫ੍ਰੀਜ਼/ਥਾਅ ਲੌਗ, ਮੀਡੀਆ ਲੌਟ ਟਰੈਕਿੰਗਇਹ ਭਾਗ ਰੂਟੀਨ ਰੱਖ-ਰਖਾਵ ਲਈ ਸਟ੍ਰਕਚਰਡ ਰਿਕਾਰਡ ਰੱਖਣ ਨੂੰ ਘੇਰਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਵਿਕਾਸ ਕਰਵਾਂ, ਪੈਸੇਜ ਇਤਿਹਾਸ, ਫ੍ਰੀਜ਼-ਥਾਅ ਘਟਨਾਵਾਂ ਅਤੇ ਮੀਡੀਆ ਲੌਟ ਟਰੈਕਿੰਗ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ, ਜੋ ਟਰੇਸੇਬਿਲਟੀ, ਟ੍ਰਬਲਸ਼ੂਟਿੰਗ ਅਤੇ ਰੈਗੂਲੇਟਰੀ-ਰੈਡੀ ਦਸਤਾਵੇਜ਼ੀਕਰਨ ਨੂੰ ਸਮਰਥਨ ਦਿੰਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਸਾਰੀਆਂ ਕਲਚਰ ਗਤੀਵਿਧੀਆਂ ਨੂੰ ਰਿਕਾਰਡ ਕਰਦਾ ਹੈ।
Designing standardized growth and passage logsDocumenting freeze and thaw events per vialMedia and supplement lot number trackingLinking records to incubators and equipmentElectronic versus paper recordkeeping systemsسبق 7ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਦੀ ਸਟੋਰੇਜ ਲਈ ਕ੍ਰਾਇਓਪ੍ਰੀਜ਼ਰਵੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ: ਕ੍ਰਾਇਓਪ੍ਰੋਟੈਕਟੈਂਟ ਚੋਣ, ਕੂਲਿੰਗ ਰੇਟ, ਟਾਰਗੈਟ ਸੈੱਲ ਘਨਤਵ, ਸਟੋਰੇਜ ਸੰਗਠਨਇਹ ਭਾਗ ਰੋਬਸਟ ਕ੍ਰਾਇਓਪ੍ਰੀਜ਼ਰਵੇਸ਼ਨ ਵਰਕਫਲੋ ਪੇਸ਼ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਕ੍ਰਾਇਓਪ੍ਰੋਟੈਕਟੈਂਟ ਚੋਣ ਅਤੇ ਘਨਤਵ, ਕੂਲਿੰਗ ਰੇਟਾਂ, ਟਾਰਗੈਟ ਸੈੱਲ ਘਨਤਵ, ਲੇਬਲਿੰਗ ਅਤੇ ਸਟੋਰੇਜ ਸੰਗਠਨ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ ਤਾਂ ਜੋ ਉੱਚ ਪੋਸਟ-ਥਾਅ ਵਾਇਏਬਿਲਟੀ ਅਤੇ ਭਰੋਸੇਯੋਗ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਦੀ ਬੈਂਕਿੰਗ ਯਕੀਨੀ ਬਣੇ। ਇਹ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਦੀ ਸਥਿਰਤਾ ਬਣਾਉਂਦੀ ਹੈ।
Choosing DMSO and alternative cryoprotectantsPreparing freezing medium and cell densityControlled-rate versus passive freezing methodsLabeling vials and mapping storage locationsTesting post-thaw recovery from pilot vialsسبق 8ਰੂਟੀਨ ਸਬਕਲਚਰ ਵਰਕਫਲੋ: ਕਨਫਲੂਐਂਸ ਟਾਰਗੈਟਸ, ਧੋਣ ਸਟੈਪਸ, ਐਨਜ਼ਾਈਮੈਟਿਕ ਅਤੇ ਨਾਨ-ਐਨਜ਼ਾਈਮੈਟਿਕ ਡਿਟੈਚਮੈਂਟ ਵਿਧੀਆਂ, ਨਿਊਟ੍ਰਲਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਰੀਸੀਡਿੰਗ ਗਣਨਾਇਹ ਭਾਗ ਪੂਰੀ ਸਬਕਲਚਰ ਵਰਕਫਲੋ ਦੇ ਵੇਰਵੇ ਦਿੰਦਾ ਹੈ, ਕਨਫਲੂਐਂਸ ਮੁਲਾਂਕਣ ਅਤੇ ਧੋਣ ਤੋਂ ਐਨਜ਼ਾਈਮੈਟਿਕ ਜਾਂ ਨਾਨ-ਐਨਜ਼ਾਈਮੈਟਿਕ ਡਿਟੈਚਮੈਂਟ, ਨਿਊਟ੍ਰਲਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ, ਗਿਣਤੀ ਅਤੇ ਰੀਸੀਡਿੰਗ ਗਣਨਾ ਤੱਕ, ਇਕਸਾਰ ਸਪਲਿਟ ਰੇਸ਼ੋ ਅਤੇ ਘੱਟੋ ਘੱਟ ਸੈਲੂਲਰ ਸਟ੍ਰੈੱਸ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਸਟੈਂਡਰਡਾਈਜ਼ ਕਰਦਾ ਹੈ।
Defining confluence targets by cell typeOptimizing wash steps to protect monolayersTrypsin and alternative enzymatic reagentsNonenzymatic dissociation and gentle scrapingNeutralization, counting, and reseeding mathسبق 9ਸੀਰਮ ਟਾਈਪਾਂ ਦੀ ਚੋਣ ਅਤੇ ਜਾਇਜ਼ਾ, ਨਿਰਧਾਰਤ ਸੀਰਮ-ਫ੍ਰੀ ਸਪਲੀਮੈਂਟਸ, ਅਤੇ ਐਂਟੀਬਾਇਓਟਿਕ ਨੀਤੀਇਹ ਭਾਗ ਸੀਰਮ ਟਾਈਪ ਚੋਣ ਅਤੇ ਜਾਇਜ਼ਾ, ਨਿਰਧਾਰਤ ਸੀਰਮ-ਫ੍ਰੀ ਸਪਲੀਮੈਂਟਸ ਅਤੇ ਐਂਟੀਬਾਇਓਟਿਕ ਨੀਤੀਆਂ ਨੂੰ ਪਰਖਦਾ ਹੈ, ਸੈੱਲ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ, ਐਕਸਪੈਰੀਮੈਂਟਲ ਪੁਨਰੁਤਪਾਦਕਤਾ, ਲਾਗਤ ਅਤੇ ਬਾਇਓਸੇਫਟੀ ਨੂੰ ਸੰਤੁਲਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ ਜਦੋਂ ਕਿ ਐਸੇਜ਼ ਵਿੱਚ ਕਨਫਾਊਂਡਿੰਗ ਵੇਰੀਏਬਲਾਂ ਨੂੰ ਘੱਟ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਵਿਗਿਆਨਕ ਚੋਣ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ।
Comparing FBS, FCS, and human serum sourcesLot qualification and serum batch testingDesigning defined serum-free supplement mixesWhen to use or avoid routine antibioticsDocumenting and justifying serum choices
