سبق 1ਕੈਪਚਰ ਸਟੈਪ: ਪ੍ਰੋਟੀਨ A ਐਫਿਨਿਟੀ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਸਿਧਾਂਤ, ਕੈਪੈਸਿਟੀ, ਐਲੂਸ਼ਨ ਸ਼ਰਤਾਂ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਡਕਟ ਕੁਆਲਿਟੀ 'ਤੇ ਪ੍ਰਭਾਵਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਅਤੇ Fc-ਫਿਊਜ਼ਨ ਪ੍ਰੋਟੀਨਾਂ ਲਈ ਪ੍ਰੋਟੀਨ A ਐਫਿਨਿਟੀ ਕੈਪਚਰ 'ਤੇ ਫੋਕਸ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਬਾਈੰਡਿੰਗ ਸਿਧਾਂਤ, ਡਾਇਨੈਮਿਕ ਬਾਈੰਡਿੰਗ ਕੈਪੈਸਿਟੀ, ਐਲੂਸ਼ਨ ਸ਼ਰਤਾਂ, ਇੰਪਿਊਰਿਟੀ ਕਲੀਅਰੈਂਸ, ਰੈਜ਼ਿਨ ਲਾਈਫਟਾਈਮ ਅਤੇ ਕੈਪਚਰ ਦੇ ਡਾਉਨਸਟ੍ਰੀਮ ਪੋਲਿਸ਼ਿੰਗ ਲੋੜਾਂ 'ਤੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨੂੰ ਕਵਰ ਕਰਦਾ ਹੈ।
Protein A binding mechanism and ligand formatsDynamic binding capacity and loading strategiesElution pH, strip conditions, and pool handlingClearance of HCP, DNA, and leached Protein AResin cleaning, sanitization, and lifetime trackingسبق 2ਫਾਈਨਲ ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਸਟੈਰਾਈਲ ਫਿਲਟ੍ਰੇਸ਼ਨ: ਬਫਰ ਚੋਣ, ਐਕਸੀਪੀਐਂਟ ਭੂਮਿਕਾਵਾਂ ਅਤੇ ਸਥਿਰਤਾ ਵਿਚਾਰਫਿਲਿੰਗ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਫਾਈਨਲ ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਅਤੇ ਸਟੈਰਾਈਲ ਫਿਲਟ੍ਰੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਵਰਣਨ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਬਫਰ ਸਿਸਟਮਾਂ, ਐਕਸੀਪੀਐਂਟ ਚੋਣ, ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸਥਿਰਤਾ, ਫਿਲਟਰ ਵੈਲੀਡੇਸ਼ਨ, ਕੰਟੇਨਰ ਕਲੋਜ਼ਰ ਅਤੇ ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨ ਦੇ ਸ਼ੈਲਫ ਲਾਈਫ ਅਤੇ ਰੈਗੂਲੇਟਰੀ ਸਬਮਿਸ਼ਨਾਂ 'ਤੇ ਪ੍ਰਭਾਵ 'ਤੇ ਚਰਚਾ ਕਰਦਾ ਹੈ।
Buffer species, pH, and ionic strength selectionRoles of stabilizing excipients and surfactantsProtein degradation pathways and stability studiesSterile filtration validation and filter integrityContainer closure and hold time considerationsسبق 3ਕੁਆਲਿਟੀ ਮੁਲਾਂਕਣ ਲਈ ਐਨਾਲੀਟੀਕਲ ਮੈਥਡਾਂ: ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਅਤੇ ਅਖੰਡਤਾ ਲਈ SDS-PAGE/ਵੈਸਟਰਨ ਬਲੌਟਸ਼ੁੱਧਤਾ ਅਤੇ ਅਖੰਡਤਾ ਨੂੰ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਲਈ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੈਟਿਕ ਮੈਥਡਾਂ ਨੂੰ ਪੇਸ਼ ਕਰਦਾ ਹੈ, SDS-PAGE ਅਤੇ ਵੈਸਟਰਨ ਬਲੌਟ 'ਤੇ ਫੋਕਸ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਸੈਂਪਲ ਪ੍ਰੀਪੇਰੇਸ਼ਨ, ਫ੍ਰੈਗਮੈਂਟਸ ਅਤੇ ਐਗ੍ਰੀਗੇਟਸ ਦੀ ਪਛਾਣ, ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ, ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਅਤੇ ਕੰਪੈਰੇਬਿਲਿਟੀ ਅਧਿਐਨਾਂ ਵਿੱਚ ਵਰਤੋਂ 'ਤੇ ਚਰਚਾ ਕਰਦਾ ਹੈ।
Reducing and nonreducing SDS-PAGE workflowsDensitometry for purity estimation and limitsWestern blot transfer and detection parametersIdentification of fragments and misprocessed speciesUse in lot release and comparability exercisesسبق 4ਪਿਊਰੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਸਟੈਪਸ ਵਿੱਚ ਵਾਇਰਲ ਕਲੀਅਰੈਂਸ ਰਣਨੀਤੀਆਂ ਅਤੇ ਇੰਟੀਗ੍ਰੇਸ਼ਨ (ਘੱਟ pH ਇਨੈਕਟੀਵੇਸ਼ਨ, ਨਾਨੋਫਿਲਟ੍ਰੇਸ਼ਨ)ਡਾਉਨਸਟ੍ਰੀਮ ਪ੍ਰੋਸੈਸਿੰਗ ਵਿੱਚ ਵਾਇਰਲ ਰਿਸਕ ਮਾਈਟੀਗੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਕਵਰ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਘੱਟ pH ਇਨੈਕਟੀਵੇਸ਼ਨ, ਡਿਟਰਜੈਂਟ ਟ੍ਰੀਟਮੈਂਟ ਅਤੇ ਨਾਨੋਫਿਲਟ੍ਰੇਸ਼ਨ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ। ਸਟੈਪ ਪਲੇਸਮੈਂਟ, ਰੋਬਸਟਨੈੱਸ, ਵੈਲੀਡੇਸ਼ਨ ਅਧਿਐਨ ਅਤੇ ਸਮੁੱਚੀ ਪਿਊਰੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਰਣਨੀਤੀ ਵਿੱਚ ਇੰਟੀਗ੍ਰੇਸ਼ਨ 'ਤੇ ਚਰਚਾ ਕਰਦਾ ਹੈ।
Regulatory expectations for viral safety marginsLow pH viral inactivation design and validationDetergent-based inactivation and compatibilityViral retentive nanofiltration selection and sizingSpiking studies and overall clearance claimsسبق 5ਇਨ-ਪ੍ਰੋਸੈਸ ਟੈਸਟਿੰਗ ਅਤੇ ਰਿਲੀਜ਼ ਐਸੇਜ਼: ਸਟੈਰੀਲਿਟੀ, ਐਂਡੋਟੌਕਸਿਨ, ਹੋਸਟ ਸੈੱਲ ਪ੍ਰੋਟੀਨ (HCP), ਰੈਜ਼ਿਊਅਲ DNA ਐਸੇਜ਼ਸੁਰੱਖਿਆ ਅਤੇ ਕੁਆਲਿਟੀ ਲਈ ਇਨ-ਪ੍ਰੋਸੈਸ ਅਤੇ ਰਿਲੀਜ਼ ਐਸੇਜ਼ ਦੀ ਸਮੀਖਿਆ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਸਟੈਰੀਲਿਟੀ, ਐਂਡੋਟੌਕਸਿਨ, ਹੋਸਟ ਸੈੱਲ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਤੇ ਰੈਜ਼ਿਊਅਲ DNA ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ। ਬਾਇਓਲੌਜ਼ਿਕਸ ਲਈ ਮੈਥਡ ਸਿਧਾਂਤ, ਐਕਸੈਪਟੈਂਸ ਕ੍ਰਾਈਟੀਰੀਆ, ਸੈਂਪਲਿੰਗ ਪਲਾਨਾਂ ਅਤੇ ਰੈਗੂਲੇਟਰੀ ਉਮੀਦਾਂ 'ਤੇ ਜ਼ੋਰ ਦਿੰਦਾ ਹੈ।
Sterility testing methods and incubation schemesEndotoxin testing by LAL and alternative assaysHost cell protein immunoassays and coverageResidual DNA quantification by qPCR methodsSampling plans and setting specification limitsسبق 6ਇੰਟਰਮੀਡੀਏਟ ਅਤੇ ਪੋਲਿਸ਼ਿੰਗ ਸਟੈਪਸ: ਆਇਆਨ ਐਕਸਚੇਂਜ, ਹਾਈਡ੍ਰੋਫੋਬਿਕ ਇੰਟਰੈਕਸ਼ਨ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ, ਸਾਈਜ਼ ਐਕਸਕਲੂਜ਼ਨ — ਭੂਮਿਕਾਵਾਂ ਅਤੇ ਚੋਣ ਮਾਪਦੰਡਆਇਆਨ ਐਕਸਚੇਂਜ, ਹਾਈਡ੍ਰੋਫੋਬਿਕ ਇੰਟਰੈਕਸ਼ਨ ਅਤੇ ਸਾਈਜ਼ ਐਕਸਕਲੂਜ਼ਨ ਵਰਤ ਕੇ ਇੰਟਰਮੀਡੀਏਟ ਅਤੇ ਪੋਲਿਸ਼ਿੰਗ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਨੂੰ ਖੋਜਦਾ ਹੈ। ਰੈਜ਼ਿਨ ਚੋਣ, ਓਪਰੇਟਿੰਗ ਸ਼ਰਤਾਂ, ਇੰਪਿਊਰਿਟੀ ਕਲੀਅਰੈਂਸ, ਸਕੇਲੇਬਿਲਿਟੀ ਅਤੇ ਕ੍ਰਿਟੀਕਲ ਕੁਆਲਿਟੀ ਐਟ੍ਰੀਬਿਊਟਸ 'ਤੇ ਪ੍ਰਭਾਵ 'ਤੇ ਜ਼ੋਰ ਦਿੰਦਾ ਹੈ।
Ion exchange modes, binding mechanisms, and selectivityHydrophobic interaction chromatography design and tuningSize exclusion chromatography for aggregates and variantsResin selection, loading, and column packing criteriaPolishing step integration into overall purification trainسبق 7ਫੰਕਸ਼ਨਲ ਐਸੇਜ਼: ਬਾਈੰਡਿੰਗ ਲਈ ELISA, ਪੋਟੈਂਸੀ ਅਤੇ ਮੀਕੈਨਿਜ਼ਮ ਪੁਸ਼ਟੀ ਲਈ ਸੈੱਲ-ਅਧਾਰਿਤ ਬਾਇਓਐਸੇਬਾਈੰਡਿੰਗ, ਪੋਟੈਂਸੀ ਅਤੇ ਐਕਸ਼ਨ ਦੇ ਮੀਕੈਨਿਜ਼ਮ ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰਨ ਲਈ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਫੰਕਸ਼ਨਲ ਐਸੇਜ਼ ਦਾ ਵੇਰਵਾ ਦਿੰਦਾ ਹੈ। ELISA ਫਾਰਮੈਟਸ, ਸੈੱਲ-ਅਧਾਰਿਤ ਬਾਇਓਐਸੇਜ਼, ਰੈਫਰੈਂਸ ਸਟੈਂਡਰਡਸ, ਐਸੇ ਵੈਲੀਡੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਵੇਰੀਏਬਿਲਿਟੀ ਨੂੰ ਮੈਨੇਜ ਕਰਨ 'ਤੇ ਫੋਕਸ ਕਰਦਾ ਹੈ ਤਾਂ ਜੋ ਇਕਸਾਰ ਬਾਇਓਲੌਜੀਕਲ ਐਕਟੀਵਿਟੀ ਦਾਅਵੇ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਏ।
Direct and sandwich ELISA formats and optimizationLigand binding assay controls and reference curvesCell-based potency assay design and readoutsAssay qualification, validation, and system suitabilityManaging variability and establishing acceptance limitsسبق 8ਐਨਾਲੀਟੀਕਲ ਮੈਥਡਾਂ ਜਾਰੀ: ਐਗ੍ਰੀਗੇਟਸ ਅਤੇ ਸਾਈਜ਼ ਵੇਰੀਐਂਟਸ ਲਈ HPLC/SEC, ਚਾਰਜ ਵੇਰੀਐਂਟਸ ਲਈ cIEF/ICPL, ਆਈਡੈਂਟਿਟੀ ਲਈ ਮਾਸ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਮੈਟ੍ਰੀਪ੍ਰੋਡਕਟ ਕੈਰੈਕਟਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਲਈ ਮੁੱਖ ਐਨਾਲੀਟੀਕਲ ਮੈਥਡਾਂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਐਗ੍ਰੀਗੇਟਸ ਲਈ HPLC ਅਤੇ SEC, ਚਾਰਜ ਵੇਰੀਐਂਟਸ ਲਈ cIEF ਅਤੇ ਆਇਾਨ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ, ਅਤੇ ਆਈਡੈਂਟਿਟੀ, ਸੀਕੁਐਂਸ ਪੁਸ਼ਟੀ ਅਤੇ ਪੋਸਟ-ਟ੍ਰਾਂਸਲੇਸ਼ਨਲ ਮੌਡੀਫਿਕੇਸ਼ਨਾਂ ਲਈ ਮਾਸ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਮੈਟ੍ਰੀ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ।
SEC-HPLC for aggregates and soluble oligomersReversed-phase and ion-exchange HPLC profilingcIEF and icIEF for charge heterogeneity mappingMass spectrometry for identity and glycoformsMethod qualification and system suitability testsسبق 9ਪ੍ਰਾਇਮਰੀ ਰਿਕਵਰੀ: ਸੈੱਲ ਹਟਾਉਣ ਵਿਕਲਪ (ਸੈਂਟ੍ਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ, ਡੈਪਥ ਫਿਲਟ੍ਰੇਸ਼ਨ) ਅਤੇ ਕਲੈਰੀਫਾਈੰਗ ਰਣਨੀਤੀਬਾਇਓਰੀਐਕਟਰ ਹਾਰਵੈਸਟ ਦੀ ਪ੍ਰਾਇਮਰੀ ਰਿਕਵਰੀ ਨੂੰ ਕਵਰ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਸੈੱਲ ਅਤੇ ਡਿਬ੍ਰੀਸ ਹਟਾਉਣ 'ਤੇ ਫੋਕਸ ਕਰਦਾ ਹੈ ਸੈਂਟ੍ਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਡੈਪਥ ਫਿਲਟ੍ਰੇਸ਼ਨ ਨਾਲ। ਫਲੌਕੂਲੇਸ਼ਨ, ਫਿਲਟਰ ਟ੍ਰੇਨਾਂ, ਕੈਪੈਸਿਟੀ, ਸਕੇਲੇਬਿਲਿਟੀ ਅਤੇ ਡਾਉਨਸਟ੍ਰੀਮ ਕਾਲਮ ਪਰਫਾਰਮੈਂਸ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਡਕਟ ਕੁਆਲਿਟੀ 'ਤੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨੂੰ ਹੱਲ ਕਰਦਾ ਹੈ।
Harvest conditioning, flocculation, and pH adjustmentDisc-stack centrifugation design and optimizationDepth filtration media selection and sizingClarification trains and turbidity controlImpact of clarification on column lifetime